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1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。
2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。
3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。
4. 封片前一定要換用TBS 充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會影響結(jié)果觀察。
5. 如須復(fù)染細胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。
注意以下事項:
1,用蒸餾水或者去離子水把植物組織沖洗干凈,然后用濾紙把周圍的水分吸干。
2,組織重量不能低于50mg
3,樣本的勻漿比例為10%,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液選取磷酸鹽緩沖液(PBS)PH控制在7.2-7.4.